Хочу понять, сработала ли прививка — и нужна ли она мне вообще. Для этого же нужно сделать тест на антитела? А какой? Спойлер: простите, но никакой

Массовая вакцинация против коронавируса в России пока стартовала лишь формально, и в большинстве регионов прививку найти почти невозможно. Тем не менее многие из тех, кто успел вакцинироваться, хотели бы знать — выработались у них антитела или нет. Лабораторий, которые предлагают тесты на антитела, уже сейчас очень много, но путаницы, похоже, еще больше. «Медуза» попыталась собрать главные вопросы о тестировании на антитела до и после вакцинации и объясняет, что следует иметь в виду, если вы хотите сделать подобное исследование.

Начнем с вопроса для тех, кто еще не прививался. Надо ли сдавать на антитела перед вакцинацией?

Коротко:

Нет. 

Длиннее:

Сейчас эксперты сходятся на том, что тестироваться на антитела перед вакцинацией не нужно, в этом согласны и в американских Центрах по контролю и профилактике заболеваний (CDC) и в российском Минздраве (.pdf). Во-первых, сейчас нет оснований считать, что перенесенный ковид приводит к каким-либо отрицательным последствиям при вакцинации. Во-вторых, вакцинный иммунитет потенциально может быть более стойким, чем естественный, полученный в результате болезни. Так это или нет — покажет время. Людей, которые достоверно переболели ковидом согласно текущим правилам Минздрава не вакцинируют.

Я сделал прививку. Нужно ли мне теперь проверять наличие антител?

Коротко:

Нет, не нужно. Скорее всего, ваша иммунная система отреагировала на вакцину так же, как у добровольцев, участвовавших в испытаниях, и вероятность заболеть для вас снизится в соответствии с измеренной эффективностью вакцины. Проверить наличие антител с помощью теста, конечно, можно — но если вы не подозреваете, что вам неправильно сделали укол или дали испорченную вакцину, это будет актом чистого любопытства. Возможно в будущем, когда появится больше данных о вакцинированных, такое тестирование станет более осмысленным, но пока практических выводов из результатов теста извлечь не удастся.

Длиннее:

Проблема с тестами на антитела заключается в том, что у нас недостаточно сведений для того, чтобы интерпретировать их результаты. Мы до сих пор не знаем, что именно отличает тех людей, которые все-таки заболевают после вакцинации, от тех, кто не заболевает. Другими словами, мы не знаем факторы, коррелирующие с защитой, полученной благодаря вакцине. Это может быть уровень активации Т-клеток, количество антител к S-белку или количество антител к какой-то определенной его части. А может быть, это определяется совсем другими особенностями иммунной системы, которые с антителами не связаны вовсе.

Разработчики «Спутника V» пока не довели до конца третью фазу клинических испытаний своей вакцины (и есть риск, что уже не доведут) — поэтому мы не знаем, что тот или иной уровень антител у вакцинированных говорит о реальной защите от заболевания. Западные производители вакцин (например, Pfizer/BioNTech и Moderna) завершили исследование. Но и от них нет никаких данных о том, чем отличаются люди, которые получили вакцину, но все-таки заболели, от тех, кто не заболел, — в антителах ли дело или нет. Заболевших после получения вакцины пока просто очень мало — в исследовании Pfizer/BioNTech их было всего восемь человек. Можно ожидать, что по мере вакцинации такие данные будут собраны и опубликованы.

Конечно, из общих соображений разумно ожидать, что уровень защиты от инфекции (по крайней мере, на первом этапе) будет зависеть от уровня нейтрализующих антител — то есть тех, которые налипают на вирус и блокируют его вход в клетку. Но определить уровень нейтрализующих антител с помощью обычных тестов так, как это делают ученые, в клинической лаборатории нельзя — для этого нужно иметь допуск на работу с настоящим вирусом.

В качестве удовлетворительной замены можно использовать тесты на антитела к участку S-белка вируса, который непосредственно нацелен на белок-мишень в организме человека. Такие тесты на рынке есть. Однако и здесь остается проблема с интерпретацией результатов — в результате теста вы получите какое-то значение, которое захочется с чем-то сравнить. Но сделать это практически невозможно из-за особенностей того, как устроено тестирование и как его делают разные производители.

Я все-таки хочу сделать тест. Их сейчас так много — какой выбрать и когда делать?

Коротко:

Главное, чтобы это был тест на иммуноглобулины типа IgG к S-белку. Хорошо, если точно такой же тест использовался в каких-то международных публикациях — тогда хотя бы есть надежда сравнить свой результат с известной статистикой. В статье разработчиков «Спутника V» результат иммунизации оценивался на 42-й день после первой прививки — примерно тогда можно проверять свои антитела.

Длиннее:

Тесты различаются прежде всего:

• по тому, с каким антигеном вируса связываются исследуемые антитела;
• по тому, к какому типу они относятся (IgM, IgG, очень редко — IgA).

Большинство современных тестов проверяют наличие антител к нуклеокапсидному белку (N-белку) коронавируса, который находится внутри вирусной частицы. Но почти все применяемые сейчас вакцины (Центра Гамалеи, Pfizer/BioNTech, Moderna, Cansino Bio, AstraZeneca и т. д.) сделаны на основе шиповидного белка (спайка, S-белка). Именно антитела к S-белку бывают нейтрализующими. Определять наличие антител к N-белку для проверки вакцинного иммунитета бессмысленно — а если такие антитела у вас все-таки детектируются, это значит, что вы, скорее всего, переболели коронавирусной инфекцией до вакцинации.

Чтобы проверить, сработала ли прививка, искать у себя имеет смысл антитела типа IgG к шиповидному белку коронавируса, так как IgM не являются долгосрочными антителами. Нужные антитела IgG также могут называться антителами к спайку, к S-белку или к RBD-домену (это рецептор-связывающая часть шиповидного белка).

Тесты на антитела к S-белку, доступные в России, предлагает, например, компания «Вектор-Бест» (продается в компаниях «Инвитро», «Хеликс» и других). Другой такой тест, разработанный в Институте молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта, предлагает компания Genetico. Немецкий тест Euroimmun предлагает тест на антитела к нуклеокапсиду и смеси антигенов из S-белка (IgM) и антитела к S-белку (IgG). Есть и более редкие тесты на S-белок, например компании Beckman Coulter (продается в некоторых российских городах в «Гемотесте», CMD, «Лаборатории ДНК-диагностики» и др.). 

В супермаркете продаются недорогие тест-полоски — может, их достаточно?

Коротко:

Не достаточно. В инструкциях обычно очень мало информации, и порой вообще не понятно, что за антиген определяет данный тест. Такие тест-полоски нужны не для вакцинированных, а для проверки факта болезни в прошлом. Если они нашли хоть что-то, то — с поправкой на точность теста — человек уже переболел.

Длиннее:

Тест-полоски, или lateral flow assay, — это изящная технология, в которой определение антител идет в очень небольшом объеме крови, а для получения результата достаточно 10–20 минут (подробнее о технологии можно прочитать тут).

Главный недостаток таких тестов, что они — «качественные», то есть на вопрос о наличии антител отвечают только «да» или «нет». В случае положительного ответа неясно, к какому белку эти антитела — но, как правило, не к тому, к которому делаются вакцины. Неизвестно и сколько точно антител в организме. Иными словами, такой тест не даст информации о защищенности в результате вакцинации. Единственное, в чем может быть уверенность, что человек, скорее всего, переболел в прошлом (с поправкой на специфичность теста).

И какой тест нужно делать, чтобы понять, сколько у меня антител?

Коротко:

Для того, чтобы понять, сколько у вас на самом деле антител, лучше всего подходят количественные тесты, сделанные в лаборатории. Но с ними все сложнее, чем кажется. На самом деле есть не два, а три вида тестов:

1. качественные — они дают ответ «да» или «нет»;
2. количественные — они дают ответ об уровне антител в абсолютных значениях;
3. полуколичественные — они дают ответ в условных единицах относительно определенного внутреннего стандарта, то есть порога, выше которого считается, что антител достаточно. 

Лучше всего подходит второй тип — чисто количественные тесты. Если вы хотите сделать несколько тестов, чтобы отслеживать динамику, нужно делать тесты одной марки.

Длиннее:

С качественными тестами все просто: в отчете будет просто написано «отрицательный» или «положительный» результат. Лаборатория сама сравнит полученное значение в образце с контролем и никакой дополнительной информации по цифрам не даст. Например, «Гемотест» предлагает такого рода анализ на суммарные антитела IgG и IgM к нуклеокапсидному белку, используя тест компании Roche, а «Медси» — сразу на три типа антител: IgA, IgM и IgG. Существенной разницы между ними быть не должно, но это еще один источник возможного разногласия между результатами из разных лабораторий.

Полуколичественный тест работает примерно так же, только вы получите дополнительный «бонус» в виде значения, которое называют «коэффициентом позитивности». Это относительная цифра, которая показывает превышение над пороговым значением, отделяющим отрицательные результаты от положительных. Вы сможете сами посмотреть на свой результат, на порог и попытаться сделать из этого выводы (порог обычно нормирован и равен единице). Полученный результат, например значение «1,8», будет подразумевать, что у вас в 1,8 раза больше минимального количества антител, которых достаточно, чтобы считать результат положительным (так выдаются результаты на основе, например, тестов Abbott или «Вектор-Бест»).

В результатах полуколичественного теста никаких абсолютных чисел вроде «10 микрограмм антител на миллилитр плазмы» не будет. Вы сможете только оценить отношение вашего результата к тому, что компания считает пороговым значением для положительных образцов. И важно понимать, что сам порог у разных производителей и даже в разных партиях тестов может быть разным.

Сравнивать между собой результаты полуколичественных тестов из разных лабораторий бессмысленно. Пороговое значение для положительного теста может меняться и часто определяется при каждой процедуре обработки образцов заново (на одном и том же планшете измеряют исследуемые образцы и контрольные). Многое может зависеть от того, например, сколько реактивы стояли на лабораторном столе, каким именно прибором измеряли результат и так далее — в итоге формально одна и та же методика может давать разные результаты.

Скорее всего, существенных отличий не будет, но если в одной лаборатории вы получите значение 1,5, а в другой с тем же типом теста — 1,6, то ничего кроме того, что это «положительный результат» в обоих случаях, сказать невозможно.

Наконец, «количественные» тесты по идее должны сообщать абсолютные значения содержания антител в крови. Антитела — это сложные молекулы, их концентрацию измеряют не в граммах на миллилитр, а в разведениях, или титрах. Титром называется такое разведение плазмы крови, при котором антитела все еще детектируются (это может быть 1:10, 1:50, 1:100 и т. д.). Это стандартная для иммунологических анализов оценка, именно ее можно встретить в научных публикациях о вакцинах (например, в публикации о «Спутнике V» средний титр антител против S-белка на 42-й день после вакцинации составлял около 1:12800, нейтрализующих — 1:40). Удобнее всего результаты измерения количества антител при тестировании было бы получить именно в этих единицах — это позволило бы соотнести свой результат с данными публикаций. Однако нам не удалось найти ни одного производителя, который проводил бы тесты именно таким образом.

Как правило, в результатах количественного теста можно получить «ОЕ/мл», где ОЕ — это относительные единицы. В статье с описанием тестов DiaSorin, например, сообщается, что лабораторный прибор, проводящий анализ образцов, сам определяет концентрацию антител, исходя из полученных данных, а затем переводит ее в эти самые относительные единицы.

Но несмотря на название, относительные единицы отражают абсолютное число, которое не зависит от того, в какой лаборатории и как сделан данный тест (то есть оно согласовано в рамках всех проводимых тестов данной марки). Это значит, что такие результаты можно сравнивать между собой и посмотреть, падает ли у вас количество антител со временем или у кого их больше — у вас или у соседа. Но это обязательно должны быть тесты одной марки.

При этом «относительные единицы», полученные по результатам тестов разных марок, тоже могут отличаться. Сравнивать их между собой, чтобы удостовериться в наличии антител, не лучшая идея.

Более того, на отслеживании динамики и сравнении практическое применение этих данных заканчивается. Например, в приведенном выше исследовании о тесте DiaSorin выяснилось, что при результате выше 80 ОЕ/мл такая сыворотка нейтрализовала (.pdf) в эксперименте «в пробирке» более 90% вирусных частиц. Но непонятно, сработает ли это так же в реальной жизни и защитит ли человека от болезни.

Эксперимент, в котором бы людей с известным титром антител заражали настоящим вирусом и смотрели на процент заболевших, провести нельзя по этическим принципам — поэтому остается только наблюдать за естественным течением событий и анализировать долю заболевших среди вакцинированных.

Можете просто, без зауми, посоветовать нормальный тест?

Коротко:

Посоветуем после вакцинации вообще тестов не делать. Но если очень хочется — есть тест итальянской компании DiaSorin, который предлагают в «Гемотесте», «Хеликсе», «ЛабКвесте», «Ситилаб» и других лабораториях.

Длиннее:

Есть специальные тесты, которые позиционируются как тесты для проверки антител после вакцинации. В поликлиниках в этих целях используют китайский тест Mindray (в нем одновременно определяются антитела к N-белку и рецептор-связывающему домену S-белка). В платных лабораториях чаще всего используют тест итальянской компании DiaSorin (можно купить в компании «Гемотест», «Хеликс», «ЛабКвест» и других). Он показал неплохие результаты с точки зрения способности выявленных антител нейтрализовать вирусные частицы.

Но помните, что при сравнении тестов разных компаний то и дело обнаруживаются существенные различия в результатах, даже если речь идет о таких крупных, как Roche и Abbott.

Я делал тесты несколько раз. Антител сначала было много, а потом их количество снизилось. Иммунитета больше нет?

Коротко:

Нет, это нормально. Падение уровня антител неизбежно, так как организм не может бесконечно их вырабатывать. Но это не значит, что защита от коронавируса тоже краткосрочна: длительность иммунитета, особенно искусственного, в случае SARS-CoV-2 пока совершенно не известна. В любом случае достоверно подтвержденных вторичных инфекций пока известно мало.

Длиннее:

Количество антител в крови всегда снижается со временем. Это касается как переболевших, так и прошедших вакцинацию людей. Но с какой скоростью это происходит и влияет ли снижение на вероятность заболеть, сказать пока трудно. Есть наблюдения, согласно которым при тяжелом течении инфекции антител у людей вырабатывается больше и держатся они дольше, чем при легком или асимптоматическом течении. Согласно некоторым исследованиям, IgA, IgM и IgG при коронавирусной инфекции вообще начинают вырабатываться все одновременно, примерно с 6–7-го дня инфекции, а остаются у разных пациентов в течение самого разного времени.

Если даже антитела перестают выявляться в крови, это не говорит о том, что организм «забыл» об инфекции. Адаптивная иммунная система высших животных тем и отличается, что обладает памятью на инфекции, с которыми сталкивалась, — но хранится эта память прежде всего не в виде антител плазмы крови, а в виде клеток памяти, которые могут быстро активироваться при новой встрече с инфекцией.

Как именно это работает в случае с коронавирусом, точно сказать нельзя: пока прошло слишком мало времени с начала пандемии, чтобы объективно оценить «срок годности» иммунитета к этой болезни. Он бывает разный: от пожизненного иммунитета до иммунитета, длящегося всего несколько месяцев.

Косвенно о том, что иммунитет к SARS-CoV-2 может быть длительным, говорит тот факт, что достоверно подтвержденных случаев вторичной инфекции в мире пока зафиксировано очень мало. На сайте BNO News, отслеживающем случаи вторичных инфекций, сказано всего о 39 подтвержденных случаях во всем мире. Есть исследование, где медицинских работников Великобритании тестировали на антитела, а затем оценивали, сколько из них впоследствии заразятся, — из 6614 имеющих антитела людей заболели 44 человека (критерием «повторности» здесь было наличие двух положительных ПЦР-тестов с разницей в 90 дней — а это еще не гарантирует, что инфекции действительно было две, скорее это оценка сверху).